CHO细胞体外微核高内涵筛选方法的建立及应用

doi:10.3969/j.issn.1004-616x.2011.01.008

›› 2011, Vol. 23 ›› Issue (1): 31-034.doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2011.01.008

CHO细胞体外微核高内涵筛选方法的建立及应用

周飞,林海霞,常艳*

国家上海新药安全评价研究中心，上海

收稿日期:2010-05-28 修回日期:2010-10-25 出版日期:2011-01-30 发布日期:2011-01-30
通讯作者: 常艳

Evaluation of micronucleus with CHO cells using high throughput screening

ZHOU Fei,LIN Hai-xia, CHANG Yan*

National Shanghai Center for New Drug Safety Evaluation and Research, Shanghai

Received:2010-05-28 Revised:2010-10-25 Online:2011-01-30 Published:2011-01-30
Contact: CHANG Yan

摘要/Abstract

摘要： 探讨微核试验高内涵筛选方法在遗传毒性评价中的应用价值，建立简便、经济、快速、高效的微核试验高通量筛选方法。应用微核高内涵筛选方法对已知的遗传毒性阳性物质进行验证分析。方法：选择8种典型的断裂剂或非整倍体诱导剂进行试验。应用Cellomics ArrayScan高内涵筛选系统检测药物诱发的CHO细胞微核发生率。结果：苯并芘在25.15和50.3 μg/ml可诱发微核显著增加(P＜0.05)；依托泊苷在0.16~20 μg/ml浓度范围均可诱发微核发生率显著增加(P＜0.01)，在1.25~20 μg/ml浓度，细胞存活率低于50%；2-氨基芴在0.1~1.26 μg/ml的浓度范围内微核发生率和阴性对照组相比差异均无统计学意义(P＞0.05)；2-氨基蒽在6.44、12.88、25.75和51.5 μg/ml，秋水仙素在0.08 ~20.4 μg/ml，甲基磺酸乙酯在0.754、1.509和3.018 mg/ml，氯化铬在2.344 μg/ml，甲基磺酸甲酯在0.101 mg/ml浓度时，均可诱发CHO细胞微核发生率显著增加(P＜0.05或P＜0.01)。结论：微核高内涵筛选方法可以满足快速、高效、经济、可靠检测微核的要求。

关键词: 微核, 高内涵筛选, CHO细胞, 遗传毒性

Abstract: To examine the value of micronucleus high throughput screening method in micronucleus assay and develop an effective, economical, simple and fast micronucleus high throughput screening method. METHODS: To evaluate micronucleus rate with CHO cells using AssayScan High Throughput Screening system. RESULTS: B[α]P could induce micronucleus formation significantly at 25.15 μg/ml and 50.3 μg/ml. Etoposide significantly induced micronucleus formation between 0.16 μg/ml and 20 μg/ml concentrations; between 1.25 μg/ml and 20 μg/ml, cell viability was less than 50%. 2-anthramine could significantly induce micronucleus formation at 6.44 μg/ml, 12.88 μg/ml, 25.75 μg/ml and 51.5 μg/ml. Colchicine significantly induced micronucleus formation between 0.08 μg/ml and 20.4 μg/ml. EMS significantly induced micronucleus formation at 0.754 mg/ml, 1.509 mg/ml and 3.018 mg/ml. Chromium Chloride significantly induced micronucleus formation at 2.344 μg/ml. Whilst MMS could significantly induce micronucleus formation at 0.101 mg/ml. CONCLUSION: Micronucleus high throughput screening method could satisfy the requirement for an effective, economical, reliable and fast screening method.

Key words: micronucleus, high throughput screening, CHO cell, genotoxicity

周飞,林海霞,常艳*. CHO细胞体外微核高内涵筛选方法的建立及应用[J]. , 2011, 23(1): 31-034.

ZHOU Fei,LIN Hai-xia, CHANG Yan*. Evaluation of micronucleus with CHO cells using high throughput screening[J]. , 2011, 23(1): 31-034.

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Evaluation of micronucleus with CHO cells using high throughput screening

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